Em Killing Floor você joga como parte de uma equipe especial para lutar contra legiões de zumbis clonados. A Horzine Biotech liberou uma quantidade infinita de clones da instalação e os cidadãos estão se afogando nessas ondas de carne humana. A polícia local está tentando combatê-los, mas não há progresso. O governo britânico decide formar uma equipe especial de combatentes para combater uma grande quantidade de inimigos em seu território.
Cada nível do jogo tem uma quantidade precisa de ondas de acordo com sua dificuldade. A cada onda, o número de zumbis e tipos mudará, tornando-se mais desafiador para viver. Ao vencer a rodada com sucesso e dependendo de suas habilidades, o jogo premia com dinheiro que você pode gastar em novas armas e suprimentos. A alta variedade de classes adicionou um estilo de jogo diferente para cada jogador. Você pode ser um Pistoleiro e usar pistolas, Comando que usa rifles ou Suporte que usa espingardas. Cada classe tem suas vantagens e vantagens que podem ser desbloqueadas ao subir de nível. Como a onda final, os jogadores devem enfrentar um chefe com uma mecânica única.